Využitie metódy ELISA na štúdium enzýmovej hydrolýzy butyrylcholínesterázy v biologickom materiáli

Autoři

  • K. Targošová Katedra farmakológie a toxikológie, Farmaceutická fakulta, Univerzita Komenského, Bratislava, Slovensko
  • M. Kučera Katedra farmakológie a toxikológie, Farmaceutická fakulta, Univerzita Komenského, Bratislava, Slovensko
  • A. Hrabovská Katedra farmakológie a toxikológie, Farmaceutická fakulta, Univerzita Komenského, Bratislava, Slovensko

Klíčová slova:

butyrylcholínesteráza, metóda ELISA, protilátky

Abstrakt

The aim of this project was to design ELISA assay using new antibodies against human butyrylcholinesterase, which enable one to work with “pure” enzyme. The amount of primary antibodies, human plasma and substrate were determined from the saturation curves. For the detection, 1 mM butyrylthiocholine substrate in presence of Ellman's reagent (0.5 mM DTNB) and 5 mM HEPES, pH 7.4 or 1 mM indoxylacetate in 0.1 mM phosphate buffer saline, pH 7.4 were used. This method makes it possible to study both steady-state and pre-steady-state phases in butyrylcholinesterase-catalyzed hydrolyzes. In conclusion, we propose a simple and reliable method to study butyrylcholinesterase activity in a small amount of biological samples, while captured “pure” enzyme can be used for studying the enzyme kinetics and activity changes in selected pathological models.

Stahování

Publikováno

15.06.2016

Jak citovat

Targošová, K., Kučera, M., & Hrabovská, A. (2016). Využitie metódy ELISA na štúdium enzýmovej hydrolýzy butyrylcholínesterázy v biologickom materiáli. Chemické Listy, 110(6), 452–455. Získáno z http://chemicke-listy.cz/ojs3/index.php/chemicke-listy/article/view/195

Číslo

Sekce

Články

Nejaktuálnější články stejného autora (stejných autorů)