peptidy

Zakazkova synteza peptidu

Ivo Blaha
Peptidy jsou latky s sirokou skalou biologickych ucinku od hormonalnich leciv az k jedum hadu ci muchomurek. Proto nasly pouziti jak v humanni a veterinarni medicine, tak v zakladnim nebo aplikovanem vyzkumu v oblastech biochemie, farmakologie a imunologie. Imunologove pouzivaji peptidy k priprave protilatek metodou imunizace pokusnych zvirat peptidem pripojenym k vhodnemu nosici. Biochemici a farmakologove zkoumaji vztah mezi strukturou (sekvenci) peptidu a jeho aktivitou (hormonalni, substratovou, inhibicni apod.). Tento vyzkum je casto doplnen studiem konformaci a fyzikalnich vlastnosti peptidu a jejich komplexu (s receptory, kovy aj.) metodami rentgenostrukturni analyzy nebo NMR spektroskopie. Kvalita potrebneho peptidu zavisi na zpusobu pouziti. Pro imunizaci staci obvykle nizsi cistota produktu (cca 60%), pro strukturne-aktivni zavislosti ci fyzikalne-chemicka mereni je treba cistoty podstatne vyssi (nad 95% HPLC cistoty).

K uvedenym ucelum je casto nutny velky pocet individualnich peptidu v miligramovych mnozstvich. Proto vznikly specializovane firmy, ktere se zabyvaji pripravou peptidu pro zakazniky. Nektere firmy pouzivaji katalogoveho prodeje, v nasem prostredi jsou nejznamejsi spolecnosti Bachem a Novabiochem. Jine firmy (napr. Genosys) se zabyvaji syntezou peptidu podle individualnich objednavek zakazniku. U nas se od roku 1994 zabyva zakazkovou syntezou peptidu firma Prague Polypeptide Institute, ktera navazala na zkusenosti laboratori Ustavu organicke chemie a biochemie a byvaleho n.p. Leciva. Prague Polypeptide Institute je soucasti mezinarodni spolecnosti Ferring-group, ktera se zabyva problematikou peptidu v sirokem zaberu.

Peptidy lze ziskavat bud izolaci z biologickeho materialu, dale genovou expresi (tyka se prevazne vysokomolekularnich peptidu) a v neposledni rade chemickou syntezou nebo semisyntezou. Pro zakazkove syntezy je vhodna jedine chemicka synteza; pouzivame temer vyhradne metodu v pevne fazi. Zakladnim principem syntezy peptidu v pevne fazi je postupna priprava peptidoveho retezce z jednotlivych aminokyselin na nerozpustnem polymernim nosici. Prebytky cinidel se odstranuji prostym odsavanim a promyvanim, meziprodukty nejsou izolovany a identifikovany. Hotovy peptid se z nosice odstepi a podrobi cisteni. Metodika v pevne fazi je rychla, velmi univerzalni, lze ji automatizovat a je mozno take pripravovat vice peptidu najednou (multiply peptide synthesis). V nasi laboratori pouzivame automaticky syntetizator vyvinuty v Ustavu organicke chemie a biochemie, ktery dovoluje pripravovat az 20 peptidu najednou, kazdy podle individualniho syntetickeho programu. Krome toho umoznuje take syntezu peptidovych knihoven.

Zakladni nabidkou nasi firmy je synteza malych sarzi (10-50 mg) libovolnych peptidu s 2-25 proteinogennimi aminokyselinami ve Vami pozadovane cistote. Peptidy dodavame jako lyofilizaty ve forme kyselin nebo amidu, pripojujeme aminokyselinovou analyzu a vysledek analytickeho HPLC. Na pozadani nebo ve slozitejsich pripadech charakterizujeme sve produkty take hmotovou spektrometrii. Dodaci lhuta je 2-4 tydny, cena se odviji od delky peptidu a jeho kvality a je uvedena v reklamnim prospektu v tomto cisle Bulletinu. Pri objednavce vetsiho poctu polozek poskytujeme slevy.

Krome zakladni nabidky Vam muzeme splnit i nektera specialni prani. Muzete si objednat napriklad vetsi sarze peptidu nebo peptidy s nekodovanymi aminokyselinami (napr. D-aminokyselinami nebo aminokyselinami s chromogennimi ci fluorogennimi znackami). Dale jsme schopni pripravit tez imobilizovane peptidy, jak individualni, tak cele peptidove knihovny (obsahuji miliony peptidu, na kazde kulicce jeden typ). Prikladem individualnich imobilizovanych peptidu jsou peptidy na perlove celuloze slouzici jako stacionarni faze pro afinitni chromatografii.

Dale jsme se rozhodli zavest specialni nabidku pro imunizace. Muzeme dodat konjugaty peptidu s proteinovymi nosici (BSA, KLH), ci peptidy primo navazane na rozvetveny polylysin (Multiple Antigenic Peptides). Konecne si lze objednat tez hotove protilatky. Zajemcum muzeme zaslat cenik nasich specialnich sluzeb pro imunology.

Kontaktni adresa: Prague Polypeptide Institute, Radiova 1, 102 27 Praha 10.